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    免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP) 目錄號:QY-10

    服務內容

    1. 溫和條件下進行蛋白抽提,BCA定量,調整蛋白濃度

    2. 樣品預處理:用Protein A/G Sepharose孵育

    3. 樣品與IP抗體進行孵育

    4. 洗滌Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并對免疫復合物進行變性處理

    5. 沉淀產物SDS-PAGE或者WB鑒定(目前暫不提供別的鑒定)

    6. Western blot檢測

    (1) 電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品

    (2) 濕法轉?。˙LOTING:Tank Transfer)

    (3) 雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)

    (4) 化學發光檢測(ECL),膠片曝光,TotalLab Quant軟件讀取IOD值(可選)

    樣品要求(樣品處理及保存見附件)

    1. 細胞>1×107;組織>30mg;細菌濕重>50mg;植物>100mg;血清>50ul

    2. 樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>500ug/樣品

    收費標準

    服務項目

    收費標準¥

    實驗周期

    免疫沉淀

    7500/基因

    3-4

    免疫沉淀+可曝光marker

    7800/基因

    3-4

    ImageQuant TL讀取條帶IOD值及計算

    詢 價!

    客戶提供材料

    1、 新鮮或正確保存的樣品

    2、 目的蛋白一抗

    3、 陽性對照樣品(盡量提供)

    4、 相關文獻(可選)

    提交給客戶結果

    1、預實驗曝光結果(膠片及掃描圖),預實驗采取2個一抗稀釋度

    2、正式實驗曝光結果(膠片及掃描圖)

    3、完整實驗報告

    4、IOD值分析報告(可選)

    5、抗體是否可以適用于IP是進行ChIP的前提

    服務說明

    1. 待檢測樣品可以是待檢測蛋白樣品,也可以是細胞、組織等其他樣品;

    2. 免疫沉淀用抗體;

    3. 檢測用普通抗體;

    4. 特異性二抗由北京啟研生物科技有限責任公司提供;

    5. IP檢測可以不進行,但是不能保證后續實驗的結果。

    對照設置

    1、 空白:無抗體,只有protein A/G

    2、 陰性對照:無蛋白,有抗體及protein A/G

    3、 陰性對照:未轉染細胞或者基因敲除樣品

    4、 無關空白抗體

    5、蛋白裂解液上清:Input。

    技術文件下載
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